Перевод лекции РУС-АНГ. Медицина

Thermal Injuries

Physical properties of napalm. Napalm is a sticky mass, usually brown (colour depends on composition), lighter than water, that is why it can burn on its surface. During burning napalm rarefies, acquires fluidity and continues burning, gets into warlike equipment, refuges and houses through apertures. It sticks well to various walls, equipment, body surface. It burns for 3-5 minutes. Flame temperature reaches 1100-1200C. During burning there is a thick cloud of black smoke with release of much carbon oxide which causes intoxication.

Characteristics of burns caused by napalm. In 95% of burns these are mostly stage 3 and 4 burns. Open parts of the body, head, face, neck and bones are mostly affected. These burns are accompanied by severe forms of shock, it appears even in case of limited injuries (up to 10% of cutaneous covering) and if burn surface is 11-20% it happens in 84% of injured. In these cases severe forms of shock are caused by combination of psychic trauma with burn and quick development of toxemia. In about an hour after appearance of burn intoxicational effects caused by napalm develop: weakness, tachycardia, muscular adynamia, etc. burns caused by napalm are associated with high mortality, including death in the battlefield. Specific local changes in the region of napalm burn are: quick swelling and blisters near regions of primary necrosis of tissues. Burn injuries are often complicated by purulence, development of lymphangitis, lymphadenitis, thrombophlebitis. Cicatrization takes a long time, post-burn scars are characterized by massiveness, are keloid in their nature, are prone to ulcerations, deform the face, development of joint contracture.

Stages of burns:

Stage 1. Erythema.

Stage 2. Blisters.

Stage 3. Necrosis of dermal superficial layers.

Stage 3b. Necrosis of all dermal layers

Stage 4. Necrosis of skin and all subcutaneous tissues.

Stage 5. Establishment of depth and area of burn at RMS

Diagnostics of burn depth is based on anamnesis data, examination of burn injury and some diagnostic tests.

1. Anamnesis. Investigation of conditions of trauma, of character of the injurer. When it is steam or hot liquid burns are superficial, if it is flame burns are deep.

2. Colour of wound. In case of superficial burn wound is pink, if burn is deep colour is grey, buff, black.

3. When burn surface is damp burn is superficial, when surface is dry burn is deep.

4. Change of colour and pain reactions. If a finger is pressed against wound surface and it becomes white and the patient feels pain then burn is superficial. If colour does not change and tactile and painful sensation are absent then burn is deep.

Methods of establishment of area of burn:

1. Nine Rule (after Wallace). According to this rule area of cutaneous covering consists of: head and neck – 9% of body surface, chest – 9, abdomen – 9, back – 9, loin and buttocks – 9, each hand – 9, each hip – 9, each shin and foot – 9, perineum and genitals 1%.

Перевод статьи Медицина укр-анг

DEPENDENCE OF DISORDERS OF ENERGY METABOLISM OF THE MYOCARDIUM ON THE LEVEL OF MATRIX METALLOPROTEINASE IN PATIENTS WITH METABOLIC SYNDROME

O.M. Kovalyova, Ye.O. Bolokadze

Kharkiv National Medical University

50 patients with metabolic syndrome and 20 practically healthy people were been examined. They underwent anthropometry and echocardiography. Plasma levels of proform of matrix metalloproteinase-1, insulin, glucose, MB-isoenzyme of creatine phosphokinase, pyruvate, lactate and lipid spectrum have been established. Close positive correlations between plasma levels of proMMP-1 and indices of energy metabolism have been established in patients with metabolic syndrome. Matrix metalloproteinase influences not only the condition of extracellular matrix but also the efficiency of different elements of energy-supply of the myocardium in patients with metabolic syndrome

Key words: matrix metalloproteinase, energy metabolism, remodeling of the myocardium of the left ventricle, extracellular matrix, metabolic syndrome.

For many years processes of energy-supply of the myocardium in different pathological conditions have been the subject of significant scientific discussions. It is known that myocardial contractility directly depends on the energy of phosphate bindings represented by adenosine triphosphate (ATP) and phosphocreatine (PC) [1-4]. For a long time PC has been considered a so-called energy buffer used in case of increase of muscular exercise. It was assumed that creatine phosphokinase (CPK) reactions were equilibrious to cytoplasmic ATP and intracellular energy transport was a passive diffusion of ATP from mitochondria till the place of its use in myofibrillas and in membranous ATP reactions [2,3]. During further study of CPK system its most active role in muscular cells due to heterogenic distribution of different CPK isoenzymes was discovered. In the myocardium about 30-40% of general CPK activity is localized in mitochondria, 40-50% - in cytoplasm and approximately 20% is related to myofibrillas, membrane of sarcoplasmic reticulum and sarcolemmatic cell membrane. In mitochondria CPK is localized on the outer side of the internal membrane and in presence of creatine it synthesizes PC from mitochondrial ATP [4]. It was supposed and later proved with physiological tests that there was close connection between CPK system and adenine nucleotide translocase due to which end product of mitochondrial reactions of energy generation in presence of kreatine was PC, not ATP which, after diffusion in myoplasm, was used by CPK isoenzymes in myofibrillas and on cellular and subcellular non-mitochondrial membranes for regeneration of ATP from ADP. In myocardial cells not the whole ATP cell reserve but only its part, localized near active centres of the corresponding ATP phases, is available for emergency usage in reactions of contractility and ion transportation. This local ATP fund directly depends on CPK and can constantly regenerate thanks to PC due to connection between ATP and CPK reactions in all cellular structures where processes of ATP energy utilization take place. It is necessary to point out that mechanisms of CPK functioning in cytosol and mitochondria are different. In cytoplasm, where soluble CPK is located, there is excess of CPK relatively to the speed of glycolysis and it functions in semi-uniform condition. In homogeneous environment CPK reaction is sensitive to PC inhibition. Thanks to specific localization of CPK and close functional association with ATP-ADP translocase, direct CPK reaction in mitochondria is accelerated due to predominant use of mitochondrial ATP. Hereby CPK can function at the speed close to maximum, at low ATP concentration in the environment. This association enables lower degree of inhibition of PC creatine kinase.

Перевод доклада для конференции в Польше

BA is a more severe emotional problem for a patient than chronic obstructive bronchitis (ChOB). Usually the diagnosis BA is percieved as a sentence, knock of wood, meanwhile the diagnosis ChOB does not cause any notable emotional response. BA is the absolute leader in LQ reduction. SLIDE 6

BA patients build various psychological and emotional systems in order to protect themselves from the disease, which substantially reduce LQ. LQ analysis is an important approach which allows to solve these problems. Standard general and specialized questionaries are the main means of LQ determination. Creation of these questionaries involves blocks of indexes which allow to evaluate physical, psychological and other criteria. In order to analyze LQ in adult BA patients general questionary SF-36, special questionnaires AQLQ, AQ-20 and others (altogether 5) are most widely used. Though these international questionnaires were developed without taking into account ukrainian public realia, they have not been adapted for our conditions, they contain about 100 questions and take up to 30 min to fill them in. AQ-20 questionnaire is the simplest, it contains 20 questions and it takes 3-5 min to fill it in for the first time and 2-3 min to fill it in for the second time. SLIDE 7

Our aim is to study influence of IGC S SLIDE 8 on LQ in BA. 72 BA patients in acute stage have been examined, aged 41.2+/-1.9, of them 32 had severe course of the disease, 40 – average course severity. Diagnosis was established in accordance with International Consensus and order № 499 issued by the MOH. Patients received step treatment according to the degree of severity.

Before and after treatment patients filled in the form which was a corresponding version of AQ-20 questionnaire. SLIDE 9. Besides, objective criteria of influence of treatment on the course of disease were evaluated (attack frequency within a week, night attacks, bronchodilator inhalation frequency) SLIDE 10.

Перевода учебника анг-рус

ИЗУЧЕНИЕ ТОЧНОСТИ И ПОЛЕЗНОСТИ СКРИНИНГА И ДИАГНОСТИЧЕСКИХ АНАЛИЗОВ

Один из способов оценки полезности скрининга или диагностических анализов при данной болезни – оценка того, насколько часто результаты правильные в двух группах: (1) группа у людей, у которых зафиксирована данная болезнь и ожидаются положительные результаты анализов и (2) группа людей, не больных данной болезнью, у которых ожидаются отрицательные результаты анализов. Этот вид исследования не так прост, как может показаться, потому что несколько факторов влияют на то, будут ли результаты точны у данного субъекта и полезен ли этот анализ в целом для диагностики или скрининга данной болезни. Среди этих факторов – стадия заболевания и его распространенность среди обследуемого населения. Как подчеркивали Рансохоф и Файнштайн (1978), население, которое участвует в оценке скрининга или диагностического анализа, должно обладать характеристиками, схожими с характеристиками населения, которое будет проходить тест. Например, данные, полученные из оценки тестов, пройденных мужчинами или молодыми людьми, могут быть неприменимы к женщинам или пожилым людям.

Ложноположительные и ложноотрицательные результаты

В науке, если ложь называют правдой, это называют или ошибкой первого рода, или ложноположительной ошибкой. Если же правду называют ложью, это называется или ошибкой второго рода, или ложноотрицательной ошибкой. Таким образом, обнаружение позитивного результата у здорового пациента – это ложноположительный результат, а обнаружение отрицательного результата у больного пациента – ложноотрицательный результат.

Стадия заболевания часто влияет на результаты анализов пациента. Например, анализы на инфекционные заболевания, такие как анализ крови на вирус иммунодефицита человека, ВИЧ и кожная туберкулиновая проба на туберкулез, в середине инфекционного периода могут быть более точными, чем в начале. Для того чтобы определить наличие кровяных антител в крови человека с ВИЧ инфекцией, могут потребоваться недели или месяцы, также как недели могут потребоваться для того чтобы у больного туберкулезом выработался иммунный клеточный ответ, проявляющийся на коже при наличии туберкулинового антигена. Таким образом, на ранней стадии развития инфекции у индивида может отсутствовать иммунологическое свидетельство наличия инфекции, и анализы, сданные в этот период, могут дать ложноотрицательный результат.

Более того, ложноотрицательные результаты могут быть получены на поздней стадии развития инфекции при таких заболеваниях, как туберкулез, т.к. болезнь тяжелая, иммунная система перегружена и не может дать позитивный результат на кожную пробу. Такая неадекватная реакция иммунной системы называется анергия (греч. «не работающий»), она может развиться на фоне любой болезни или стресса, достаточно сильных для подавления иммунной системы (Brooks et al. 1991). Пожилой возраст также может стать причиной анергии. Анергия часто наблюдается у пациентов с синдромом приобретенного иммунодефицита (СПИД), при котором существенно снижается уровень клеток T. Чтобы oпределить, есть ли у пациента с иммунодефицитом анергия, можно применить «набор анергетических кожных тестов» на наиболее распространенные антигены. Так как подверженность антигенам этого рода (например, Кандида, свинка и Трихофитон) фактически универсальна, если ни один из них не вызовет аллергическую реакцию на коже, наличие анергии очевидно.

Распространенность заболевания среди обследуемого населения важна для оценки потенциальной полезности тестов на практике. Ложноотрицательные и ложноположительные результаты могут представлять большую проблему, чем ожидалось. Например, при кожной пробе на туберкулин, ложноположительный результат обычно был у пациентов из юговосточной части США. Для этой области характерна подверженность атипичным микробактериям в почве, и вследствие перекрестной реактивности между атипичными бактериями и бактериями, на которые проводится кожная проба на туберкулин, сомнительные и даже ложноположительные результаты довольно часто встречались среди этой части населения, пока не были установлены более четкие стандарты. Для этого антиген альттуберкулин заменили очищенным протеиновым дериватом (ОПД) микобактерий при стандартизированном количестве единиц туберкулина, 5 (5 ЕТ). Более того, диаметр затвердения кожи, необходимый для позитивного результата, увеличился от 5 до 10мм. Эти ужесточенные критерии успешно использовались десятилетиями, до появления СПИДа. Теперь, из-за возможной анергии у людей с ВИЧ инфекцией, рекомендуется считать позитивным результатом меньший диаметр затвердения при кожной пробе на туберкулин (Rose, Schechter, and Adler 1995). Снижение критического диаметра также повышает частоту ложноположительных результатов среди иммунизированных бациллой Кальметта-Герена (БЦГ).

Ложноположительные и ложноотрицательные результаты случаются не только при анализах на инфекционные заболевания, как показано в данной дискуссии об использовании содержания кальция в сыворотке крови с целью исключения заболеваний щетовидной железы, особенно гиперпаратиреоза, у новых пациентов, наблюдаемых в эндокринологической клинике. Гиперпаратиреоз – это нарушение кальциевого обмена. У больного уровень кальция в сыворотке часто повышен, но может варьироваться. Когда уровень содержания кальция у пациента с гиперпаратиреозом в норме, результат считается ложноотрицательным. Когда уровень содержания кальция у пациента, не больного гиперпаратиреозом (но больного раком, саркоидозом, миеломной болезнью, страдающего от молочно-щелочного синдрома или другого заболевания, приводящего к повышению уровня содержания кальция) повышен, результат анализа на гиперпаратиреоз считается ложноположительным, даже если обнаружена другая проблема.

На рис. 7-3 показаны две возможных плотности распределения содержания кальция в сыворотке крови, первая плотность распределения – среди здорового населения, не страдающего заболеванием щетовидной железы, вторая – среди пациентов с гиперпаратиреозом. Если уровень содержания кальция относительно низок (например, ниже точки A на рис. 7-3), тогда пациент, скорее всего, не болен гиперпаратиреозом. Если уровень содержания кальция достаточно высок (например, выше точки B на рис. 7-3), у пациента скорее всего есть нарушения кальциевого обмена, возможно гиперпаратиреоз. Тем не менее, если уровень содержания кальция средний (между точками A и B) в одном анализе на уровень содержания кальция, нельзя исключать возможность наличия у пациента нарушения кальциевого обмена. При подозрении наличия данной болезни необходимо провести серию анализов на содержание кальция в сыворотке крови.

Как правило, лаборатории составляют шкалу «стандартного» оценивания измеряемых ими веществ, таких как кальций. Если содержание кальция превышает норму, необходимо провести дальнейшие диагностические анализы. Во многих лабораториях верхний предел нормы содержания кальция в сыворотке составляет 11 мг/dL. Если бы верхний предел нормы был занижен, много времени и денег пропало бы из-за использования ложноотрицательных результатов; при завышенном пределе можно было бы нераспознать больных. Как говорится ниже, определение пределов оценки чувствительности, специфичности и предиктивных оценок анализа поможет исследователям выбрать лучший предел оценок для данного теста. Было бы хорошо, если бы не было частичного совпадения результатов анализов больных и здоровых; если эти результаты верны, ошибки были допущены при проведении анализов. К сожалению, распределение оценок анализов у здоровых людей часто частично совпадает с распределением оценок анализов у больных людей.

Легче понять ложноположительные ошибки при наличии четких различий между больным и здоровым состояниями, как например при оценке пятна на маммограмме. Данная область либо представляет собой раковое образование, либо нет. Но даже эта ситуация не всегда простая. Может присутствовать аномалия (например, болезнь Шиммельбуша), но отсутствовать рак. Если присутствует только болезнь Шиммельбуша, диагноз рак, поставленный радиологом, является ложноположительным относительно рака (что представляет большую проблему), но в то же время является верным относительно наличия аномалии. Напротив, дигноз «ткань груди в норме», поставленный радиологом, является истинно отрицательным относительно рака и ложноотрицательным относительно болезни Шиммельбуша. Радиологи часто выказывают неуверенность, представляя результат как «имеется аномалия, вероятно не рак» и рекомендуя повторить маммограмму через определенное количество месяцев. Такие данные сходны с лабораторными оценками по неопределенности диапазона, их сложнее изучать чем результаты лабораторного анализа (Elmore et al. 1994, 1998).

Перевод статьи, медицина

Особенности стрептококковой деоксирибонуклеазы (стрептодорназы*) Дж. Л. ПОТТЕР И М. ЛАСКОВСКИ Кафедра биохимии, Университет Маркетта, медицинский факультет, Милуоки, Висконсин (подано на публикацию 15 декабря, 1958)

Было бы гораздо проще объяснить нуклеотидную последовательность в цепях дезоксирибонуклеиновой кислоты если бы количество ферментов, способных к гидролизу полинуклеотидной цепи в особых местах было известно и доступно. В ходе поисков таких ферментов мы обратили внимание на стрептодорназу. Фермент получают из культур Стрептококка и он доступен в достаточно чистом виде чтобы гарантировать возможность исследования его особенностей. ЭКСПЕРИМЕНТЫ И ИХ РЕЗУЛЬТАТЫ Стрептодорназа была получена доктором Б.Л. Хатчингсом (лаборатория Ледерле ), которому мы выражаем искреннюю благодарность. Согласно Кэю и др. (2) ДНК была получена из вилочковой железы теленка. Продукты ферментной биологической переработки были проанализированы с помощью колоночной хроматографии, в основном по методу Синсгеймера (3), но с описанными выше модификациями (4). Бумажная хроматография проводилась по методам Хотчкиса (5), Мархама и Смита (6) и Бергквиста (7). Бумажный ионофорез проводился по методам Мархама и Смита (6). К тому же, в исследовании использовались следующие ферменты: кристаллическая панкреатическая ДНКаза I (приобретенная у Уордингтон Биокемикал корпорейшн); простатическая фосфатаза,1 приготовленная по методу Бомана (8) с учетом описанных выше модификаций (9); фосфодиэстераза змеиного яда, приготовленная по недавно модифицированному методу,2 с использованием фракционирования ацетона по методу Кернера и Синсгеймера (10), фракционирования с использованием этанола при уровне pH 6.0, а также хроматографии сперва на карбоксиметилцеллюлозе (II), затем на ДЕАЕ-целлюлозе (12, 13). Контаминация 5'- нуклеотидазой в этих препарата была ниже уровня обнаружения. Стрептококковая ДНКаза изучалась с целью установления оптимальных условий, необходимых для активности. Рис. 1 иллюстрирует влияние pH на активность, измеренную спектрофотометрически с помощью увеличения гашения на 260 mμ. На рис. 2 показано влияние концентрации Mg++ на активность. Подобные явления активации наблюдались и с другими двухвалентными катионами: Mn++, Sr++, Ca++, Zn++, Co. ++ Полное ингибирование фермента наблюдалось в среде с содержанием 0,001 m версена (динатриевой соли этилендиаминтетрауксусной кислоты). * Тщательно очищенный препарат стрептококковой дезоксирибонуклеазы, компонент of варидазы стрептокиназы-стрептодорназы (Ледерле). При поддержке гранта Nos. E-28 и B-57A от Американского Общества по Борьбе с Раком и гранта No. AT (11-1)293 от Комиссии по атомной энергии. Предварительный доклад был опубликован (1). Адрес на данный момент: институт патологии, Университет Западного резервного района, медицинский факультет, Кливленд, Огайо. 1 Мы в долгу перед доктором Л. Каннингемом за этот препарат. 2 Не было опубликовано.

Спектрофотометрический метод также применялся для приблизительной оценки объема биологической переработки. Образцы ДНК были основательно обработаны ДНКазой I и стрептококковой ДНКазой соответственно. Затем было проведено сравнение роста оптической плотности. В случае с ДНКазой I количество разорванных межнуклеотидных связей было около 25 процентов (14). Предположим, что оптический эффект пропорционален количеству разорванных связей. Тогда соответствующая оценка биологической переработки стрептококковой ДНКазы составила бы около 18 процентов гидролизированных межнуклеотидных связей. Так как эта оценка приблизительна (15), дальнейшие эксперименты косвенно свидетельствуют о правильности приведенной выше оценки. ДНК вилочковой железы теленка (320 мг) была обработана стрептококковой ДНКазой, обработка была хроматографирована на столбце Dowex 1-X2(Рис. 3). Здесь практически не наблюдаются мононуклеотиды (первый пик на столбце представляет собой неизбежную контаминацию смолой), и следы наличия динуклеотидов. Большая часть гидролизата могла бы быть элюирована только из формата аммония 0,75 m или выше, с учетом того, что фрагменты относятся к последовательности три- и декануклеотидов. Количества мононуклеотидов (около 0,1 процента) было недостаточно для характеристики. Для того чтобы определить, исчезают ли фрагменты в 3'- или 5'-фосфате, применялась следующая процедура. "Фракция 0,75 m ," в которой преобладают тринуклеотиды, была выбрана в качестве субстрата. Если бы фрагменты исчезали в 5'-фосфате, биологическая обработка фосфодиэстеразой привела бы исключительно к смеси мононуклеотидов: pXpYpZ -> pX + pY + pZ. Если бы фрагменты исчезали в 3'-фосфате, биологическая обработка привела бы к 1/3 нуклеозидов, 1/3 нуклеотидов и 1/3 нуклеозиддифосфатов: XpYpZp ^ X + pY -f- pZp. Результаты обработки " Фракции 0,75 m," фосфодиэстеразой проиллюстрированы на Рис. 4. Присутствуют только следы наличия нуклеозидов (наличествующих во время лиофилизации фракции); нуклеозиддифосфаты отсутствуют, в то время как все четыре мононуклеотида присутствуют и составляют 96 процентов фракции 0,75 м. Таким образом, приходим к выводу, что продукты исчезают в 5'-фосфате, будучи задействоваными в биологическую переработку ДНК панкреатической ДНКазой I. Принимая во внимание это заключение, необходимо выяснить гидролизируются ли одни и те же межнуклеотидные связи ДНКазой I и стрептококковой ДНКазой, или нет. Результаты эксперимента, в котором целый, нефракционированный гидролизат ДНК одним из ферментов, был подвержен воздействию второго фермента, показаны на Рис. 5. Только в последовательности, в которой за стрептококковой ДНКазой следует ДНКаза I есть доказательство существенного дальнейшего гидролиза. Это можно интерпретировать как то, что ДНКаза I, кроме расщепления тех же связей, что и стрептококковая ДНКаза,

Concerning the Specificity of Streptococcal Deoxyribomiclease (Streptodornase*) t J. L. POTTEEf AND M. LASKOWSKI From the Department of Biochemistry, Marquette University School of Medicine, Milwaukee, Wisconsin (Received for publication, December 15, 1958)

The elucidation of nucleotide sequences in chains of deoxy-ribonucleic acid would be greatly facilitated if a number of en­zymes, capable of hydrolysing the polynucleotide chain at specific locations, were known and available. In the course of a search for such enzymes our attention fell upon strep todornase. The enzyme is derived from cultures of Streptococcus and is now avail­able in a state sufficiently pure to warrant the investigation of its specificity. EXPERIMENTAL AND KESUXTS Streptodornase was obtained through the courtesy of Dr. B. L, Hutchings (Lederle Laboratories), to whom we express our grati­tude. DNA was prepared from calf thymus according to Kay et d. (2). The products of enzymatic digestion were analyzed with col­umn chromatography essentially according to Sinsheimer (3) but modified as previously described (4). Paper ehromatog-raphy involved the methods of Hotchkisa (5), Markham and Smith (6) and Bergkvist (7). Paper ionophoresis was carried out according to Markham and Smith (6). In addition, the following enzymes have been used in this study: crystalline pancreatic DNaae I (purchased from Worthing -ton Biochemical Corporation); prostatic phosphatase,1 prepared according to Boman (8) with previously described modification (9); and snake venom phosphodiesterase prepared by a recently modified method,2 which involves acetone fractionatioa accord­ing to Koerner and Sinsheimer (10), fractionation with ethanol at pH 6.0, and chromatography first on CM-celluIose (II), then on DEAE^celluiose (12, 13), The contamination by 5'-nucleo-tidase in these preparations was below the level of detection. Streptoeoccal DNase was studied in order to establish optimal conditions for activity. Fig. 1 illustrates the influence of pH on activity measured spectrophotometrically by the increase in extinction at 260 m/i. Fig. 2 shows the effect of Mg++ concen­tration on activity. Similar activating effects were observed with other divalent cations: Mn-n-, Sr++, Ca++, Zn++, Co++. Complete inhibition of the enzyme was observed in a medium containing 0.001 m Versene (ethylenediaminetetraacetate). * A highly purified preparation of streptococcal deoxyribonu-clease, a component of Varidase Streptokinase-Streptodornase {Lederle). t Supported by Grant Nos. E-28 and B-57A from the American Cancer Society and Grant No. AT (11-1)293 from the Atomic En­ergy Commission. A preliminary report has been published (1). t Present address, Institute of Pathology, Western Reserve University School of Medicine, Cleveland, Ohio. 1 We are indebted to Dr. L. Cunningham for this preparation. 2 Unpublished.

The speetrophotometric method has also been used for an approximate estimation of the extent of digestion. Samples of DNA were exhaustively digested with DNase I and streptococcal DNase, respectively, and the increases in optical density were compared. In the case of DNase I the number of internucleotide bonds broken is established as about 25 per cent (14). On the assumption that the optical effect is proportional to the num­ber of linkages broken, the corresponding value for streptococcal DNase digestion would be about 18 per cent of internucleotide bonds hydrolyzed. Wheras this is only an approximation (15), further experiments provide indirect evidence in support of the above value. Calf thymus DNA (320 mg.) was digested with streptococcal DNase, and the digest was chromatographed on Dowex 1-X2 column (Fig. 3). There are practically no mononucleotides (the first peak from the column represents an unavoidable con­tamination from resin), and only traces of dinueleotides. The greater part of the digest could be eluted only with 0.75 m or higher ammonium formate, suggesting that the fragments are of the order of tri- to decanueleotides. The amount of mononucleotides (about O.I per cent) was too small for characterization. In order to establish whether the fragments are terminated in 3'- or S'-phosphate, the Mowing procedure was used. The "0.75 m fraction," which is composed predominantly of trinucleotides, was chosen as a substrate. Should the fragments be terminated in 5'-phosphate, the diges­tion with phosphodiesterase will lead exclusively to a mixture of mononucleotides: pXpYpZ -> pX + pY + pZ. Should frag­ments be terminated in 3'-phosphate, digestion will lead to J nucleosides, J nucleotides, and j nucleoside diphosphates: XpYpZp ^ X + pY -f- pZp. The results of the digestion of "0.75 m fraction," with phosphodiesterase are illustrated in Fig. 4. There is only a trace of nucleosides (occurring during lyo-philization of the fraction); nucleoside diphosphates are absent, whereas all four mononucleotides are present and account for 96 per cent of the 0.75 M fraction. It is concluded therefore that the products are terminated in 5'-phosphate, as they are in the digest of DNA by pancreatic DNase I. In view of this finding it appeared desirable to investigate whether the same internucleotide linkages are hydrolyzed by DNase I and streptococcal DNase. The results of the experi­ment in which a total, nonfractionated digest of DNA by one of the enzymes was subjected to the action of the second enzyme are shown in Pig. 5. Only in the sequence in which streptocoecal DNase was followed by DNase I was there evidence of substantial further digestion. The results could be interpreted to mean that DNase I, beside cleaving the same bonds as streptococcal DNase,